HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta

Tämän työn tarkoituksena oli kehittää ja validoida menetelmä Jyväskylän yliopiston Kemian laitoksella jo valmiiksi olevalle HPLC-ESI-QqQ-laitteistolle siten, että menetelmällä saataisiin kvantitatiivisesti määritettyä kortikosteroni- ja testosteronipitoisuudet hyvin vähäisestä määrästä linnun veri...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: Asikainen, Harri
Other Authors: Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta, Faculty of Sciences, Kemian laitos, Department of Chemistry, Jyväskylän yliopisto, University of Jyväskylä
Format: Master's thesis
Language:fin
Published: 2023
Subjects:
Online Access: https://jyx.jyu.fi/handle/123456789/86793
_version_ 1828193038292221952
author Asikainen, Harri
author2 Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta Faculty of Sciences Kemian laitos Department of Chemistry Jyväskylän yliopisto University of Jyväskylä
author_facet Asikainen, Harri Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta Faculty of Sciences Kemian laitos Department of Chemistry Jyväskylän yliopisto University of Jyväskylä Asikainen, Harri Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta Faculty of Sciences Kemian laitos Department of Chemistry Jyväskylän yliopisto University of Jyväskylä
author_sort Asikainen, Harri
datasource_str_mv jyx
description Tämän työn tarkoituksena oli kehittää ja validoida menetelmä Jyväskylän yliopiston Kemian laitoksella jo valmiiksi olevalle HPLC-ESI-QqQ-laitteistolle siten, että menetelmällä saataisiin kvantitatiivisesti määritettyä kortikosteroni- ja testosteronipitoisuudet hyvin vähäisestä määrästä linnun veriplasmaa ilman näytteiden derivatisointia. Laiteparametrien optimointi suoritettiin kokeilemalla eri parametrien vaikutusta testosteronin ja kortikosteronin erottuvuuteen ja vasteeseen ja valitsemalla parametreista sellaiset, joilla kyseisten yhdisteiden erottuvuus oli selkein ja vaste suurin. Työssä optimoidulla menetelmällä saadaan määritettyä kvantitatiivisesti kortikosteroni ja testosteroni 10 mikrolitrasta linnun veriplasmaa ilman näytteiden derivatisointia suuruusluokassa ng/ml. Työssä saadut määritysrajat (LOQ) olivat kortikosteronille 2,72 ng/ml ja testosteronille 3,17 ng/ml. Saadut määritysrajat ovat selvästi liian suuret, sillä jos määritysrajoina käytettäisiin pienimmän pitoisuuden standardiliuoksia, niin kortikosteronille määritysrajaksi tulisi 1,18 ng/ml (S/N = 12,5) ja testosteronille 0,98 ng/ml (S/N = 39,1). Korkean signaali-kohinasuhteen takia testosteronille saataisiin vielä tätäkin huomattavasti alhaisempi määritysraja. Hajonnat kaikissa työssä tehdyissä mittauksissa olivat alle 15 % (CV%) ja QC-näytteiden tarkkuudet testosteronille olivat 94–101 %, mutta kortikosteronille 82–83 %. Kortikosteronin alhaisiin tarkkuuksiin saattoi vaikuttaa käytetty sisäinen standardi (13C3-testosteroni), joka korjasi kortikosteronin kalibrointisuoran kulmakertoimen liian jyrkäksi. Kalibrointisuorien selitysasteet olivat kortikosteronille 0,9939 ja testosteronille 0,9954.
first_indexed 2023-05-08T20:00:54Z
format Pro gradu
free_online_boolean 1
fullrecord [{"key": "dc.contributor.advisor", "value": "Kalenius, Elina", "language": "", "element": "contributor", "qualifier": "advisor", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.author", "value": "Asikainen, Harri", "language": "", "element": "contributor", "qualifier": "author", "schema": "dc"}, {"key": "dc.date.accessioned", "value": "2023-05-08T06:23:38Z", "language": null, "element": "date", "qualifier": "accessioned", "schema": "dc"}, {"key": "dc.date.available", "value": "2023-05-08T06:23:38Z", "language": null, "element": "date", "qualifier": "available", "schema": "dc"}, {"key": "dc.date.issued", "value": "2023", "language": "", "element": "date", "qualifier": "issued", "schema": "dc"}, {"key": "dc.identifier.uri", "value": "https://jyx.jyu.fi/handle/123456789/86793", "language": null, "element": "identifier", "qualifier": "uri", "schema": "dc"}, {"key": "dc.description.abstract", "value": "T\u00e4m\u00e4n ty\u00f6n tarkoituksena oli kehitt\u00e4\u00e4 ja validoida menetelm\u00e4 Jyv\u00e4skyl\u00e4n yliopiston Kemian \nlaitoksella jo valmiiksi olevalle HPLC-ESI-QqQ-laitteistolle siten, ett\u00e4 menetelm\u00e4ll\u00e4 saataisiin \nkvantitatiivisesti m\u00e4\u00e4ritetty\u00e4 kortikosteroni- ja testosteronipitoisuudet hyvin v\u00e4h\u00e4isest\u00e4 m\u00e4\u00e4r\u00e4st\u00e4 linnun veriplasmaa ilman n\u00e4ytteiden derivatisointia. Laiteparametrien optimointi suoritettiin kokeilemalla eri parametrien vaikutusta testosteronin ja kortikosteronin erottuvuuteen ja \nvasteeseen ja valitsemalla parametreista sellaiset, joilla kyseisten yhdisteiden erottuvuus oli selkein ja vaste suurin. Ty\u00f6ss\u00e4 optimoidulla menetelm\u00e4ll\u00e4 saadaan m\u00e4\u00e4ritetty\u00e4 kvantitatiivisesti \nkortikosteroni ja testosteroni 10 mikrolitrasta linnun veriplasmaa ilman n\u00e4ytteiden derivatisointia suuruusluokassa ng/ml. Ty\u00f6ss\u00e4 saadut m\u00e4\u00e4ritysrajat (LOQ) olivat kortikosteronille \n2,72 ng/ml ja testosteronille 3,17 ng/ml. Saadut m\u00e4\u00e4ritysrajat ovat selv\u00e4sti liian suuret, sill\u00e4 jos \nm\u00e4\u00e4ritysrajoina k\u00e4ytett\u00e4isiin pienimm\u00e4n pitoisuuden standardiliuoksia, niin kortikosteronille \nm\u00e4\u00e4ritysrajaksi tulisi 1,18 ng/ml (S/N = 12,5) ja testosteronille 0,98 ng/ml (S/N = 39,1). Korkean signaali-kohinasuhteen takia testosteronille saataisiin viel\u00e4 t\u00e4t\u00e4kin huomattavasti alhaisempi m\u00e4\u00e4ritysraja. Hajonnat kaikissa ty\u00f6ss\u00e4 tehdyiss\u00e4 mittauksissa olivat alle 15 % (CV%) ja \nQC-n\u00e4ytteiden tarkkuudet testosteronille olivat 94\u2013101 %, mutta kortikosteronille 82\u201383 %. \nKortikosteronin alhaisiin tarkkuuksiin saattoi vaikuttaa k\u00e4ytetty sis\u00e4inen standardi (13C3-testosteroni), joka korjasi kortikosteronin kalibrointisuoran kulmakertoimen liian jyrk\u00e4ksi. Kalibrointisuorien selitysasteet olivat kortikosteronille 0,9939 ja testosteronille 0,9954.", "language": "fi", "element": "description", "qualifier": "abstract", "schema": "dc"}, {"key": "dc.description.provenance", "value": "Submitted by Paivi Vuorio (paelvuor@jyu.fi) on 2023-05-08T06:23:38Z\nNo. of bitstreams: 0", "language": "en", "element": "description", "qualifier": "provenance", "schema": "dc"}, {"key": "dc.description.provenance", "value": "Made available in DSpace on 2023-05-08T06:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0\n Previous issue date: 2023", "language": "en", "element": "description", "qualifier": "provenance", "schema": "dc"}, {"key": "dc.format.extent", "value": "39", "language": "", "element": "format", "qualifier": "extent", "schema": "dc"}, {"key": "dc.language.iso", "value": "fin", "language": null, "element": "language", "qualifier": "iso", "schema": "dc"}, {"key": "dc.rights", "value": "In Copyright", "language": null, "element": "rights", "qualifier": null, "schema": "dc"}, {"key": "dc.title", "value": "HPLC-MS/MS-menetelm\u00e4n kehitt\u00e4minen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi m\u00e4\u00e4ritt\u00e4miseksi linnun veriplasmasta", "language": "", "element": "title", "qualifier": null, "schema": "dc"}, {"key": "dc.type", "value": "master thesis", "language": null, "element": "type", "qualifier": null, "schema": "dc"}, {"key": "dc.identifier.urn", "value": "URN:NBN:fi:jyu-202305082883", "language": "", "element": "identifier", "qualifier": "urn", "schema": "dc"}, {"key": "dc.type.ontasot", "value": "Master\u2019s thesis", "language": "en", "element": "type", "qualifier": "ontasot", "schema": "dc"}, {"key": "dc.type.ontasot", "value": "Pro gradu -tutkielma", "language": "fi", "element": "type", "qualifier": "ontasot", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.faculty", "value": "Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta", "language": "fi", "element": "contributor", "qualifier": "faculty", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.faculty", "value": "Faculty of Sciences", "language": "en", "element": "contributor", "qualifier": "faculty", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.department", "value": "Kemian laitos", "language": "fi", "element": "contributor", "qualifier": "department", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.department", "value": "Department of Chemistry", "language": "en", "element": "contributor", "qualifier": "department", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.organization", "value": "Jyv\u00e4skyl\u00e4n yliopisto", "language": "fi", "element": "contributor", "qualifier": "organization", "schema": "dc"}, {"key": "dc.contributor.organization", "value": "University of Jyv\u00e4skyl\u00e4", "language": "en", "element": "contributor", "qualifier": "organization", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.discipline", "value": "Analyyttinen kemia", "language": "fi", "element": "subject", "qualifier": "discipline", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.discipline", "value": "Analytical Chemistry", "language": "en", "element": "subject", "qualifier": "discipline", "schema": "dc"}, {"key": "yvv.contractresearch.funding", "value": "0", "language": "", "element": "contractresearch", "qualifier": "funding", "schema": "yvv"}, {"key": "dc.type.coar", "value": "http://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc", "language": null, "element": "type", "qualifier": "coar", "schema": "dc"}, {"key": "dc.rights.copyright", "value": "\u00a9 The Author(s)", "language": null, "element": "rights", "qualifier": "copyright", "schema": "dc"}, {"key": "dc.rights.accesslevel", "value": "openAccess", "language": null, "element": "rights", "qualifier": "accesslevel", "schema": "dc"}, {"key": "dc.type.publication", "value": "masterThesis", "language": null, "element": "type", "qualifier": "publication", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.oppiainekoodi", "value": "40311", "language": "", "element": "subject", "qualifier": "oppiainekoodi", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.yso", "value": "testosteroni", "language": null, "element": "subject", "qualifier": "yso", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.yso", "value": "kortikosteroni", "language": null, "element": "subject", "qualifier": "yso", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.yso", "value": "suuren erotuskyvyn nestekromatografia", "language": null, "element": "subject", "qualifier": "yso", "schema": "dc"}, {"key": "dc.subject.yso", "value": "massaspektrometria", "language": null, "element": "subject", "qualifier": "yso", "schema": "dc"}, {"key": "dc.rights.url", "value": "https://rightsstatements.org/page/InC/1.0/", "language": null, "element": "rights", "qualifier": "url", "schema": "dc"}]
id jyx.123456789_86793
language fin
last_indexed 2025-03-31T20:02:23Z
main_date 2023-01-01T00:00:00Z
main_date_str 2023
online_boolean 1
online_urls_str_mv {"url":"https:\/\/jyx.jyu.fi\/bitstreams\/53b274a4-f509-4260-8dae-0c082dbd9c0e\/download","text":"URN:NBN:fi:jyu-202305082883.pdf","source":"jyx","mediaType":"application\/pdf"}
publishDate 2023
record_format qdc
source_str_mv jyx
spellingShingle Asikainen, Harri HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta Analyyttinen kemia Analytical Chemistry 40311 testosteroni kortikosteroni suuren erotuskyvyn nestekromatografia massaspektrometria
title HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_full HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_fullStr HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_full_unstemmed HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_short HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_sort hplc ms ms menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
title_txtP HPLC-MS/MS-menetelmän kehittäminen testosteronin ja kortikosteronin kvantitatiiviseksi määrittämiseksi linnun veriplasmasta
topic Analyyttinen kemia Analytical Chemistry 40311 testosteroni kortikosteroni suuren erotuskyvyn nestekromatografia massaspektrometria
topic_facet 40311 Analytical Chemistry Analyyttinen kemia kortikosteroni massaspektrometria suuren erotuskyvyn nestekromatografia testosteroni
url https://jyx.jyu.fi/handle/123456789/86793 http://www.urn.fi/URN:NBN:fi:jyu-202305082883
work_keys_str_mv AT asikainenharri hplcmsmsmenetelmänkehittäminentestosteroninjakortikosteroninkvantitatiiviseksimää