| Summary: | Tyypin 1 Herpes Simplex –virus on maailmanlaajuisesti levinnyt yleinen virus. Se
leviää yleisimmin limakalvokontaktissa ja voi aiheuttaa huuliherpeksen. Virus
aiheuttaa lyyttisen infektion epiteelisoluissa. Infektio voi myöhemmin levitä myös
aluetta hermottaviin hermosoluihin, joissa se aiheuttaa latentin infektion. Virus
replikoituu isäntäsolun tumassa, jossa tapahtuu myös uusien kapsidien
kokoaminen. Isäntäsolun perimä on pakattu tumaan pieneen tilavuuteen
kromatiiniksi, jonka rakenne vaikuttaa siihen, miten viruskapsidit pääsevät
liikkumaan tumassa. Herpesinfektio aiheuttaa isäntäsolun tuman rakenteissa
muutoksia, joihin kuuluu replikaatioalueiden laajeneminen, kromatiinin
pakkautuminen tuman reunoille sekä tuman koon kasvaminen. Tumassa kapsidit
liikkuvat diffuusion avulla pääasiassa kromatiinin välitiloissa ja poistuvat
kuroutumalla sisempään tumakalvoon. Tässä tutkielmassa pyrimme selvittämään,
vaikuttaako isäntäsolun tuman kromatiinin rakenteen muuntelu siihen, miten
tyypin 1 Herpes Simplex -viruskapsidit sijoittuvat tumassa. Tämän selvittämiseksi
Vero-solulinjan solujen kromatiinia kondensoitiin tai dekondensoitiin, ja solut
infektoitiin viruksilla. Näytesolut immunoleimattiin ja kuvattiin
konfokaalimikroskoopilla. Kuvista havaittiin, että viruskapsidit pääsivät
dekondensoitujen solujen kromatiinin sekaan paremmin kuin kondensoitujen.
Kuitenkaan kapsidijakaumissa ei näkynyt merkittävää eroa. Kapsidijakauma oli
samankaltainen lähes koko mittausalueella, mikä poikkesi odotetusta.
Type 1 Herpes Simplex virus (HSV-1) is a common globally spread virus. It is
transmitted most commonly by direct mucous membrane contact and it can be a
cause of cold sores. The virus causes a lytic infection in epithelial cells. The infection
can later spread to nerve cells innervating the area where it causes a latent infection.
Replication of the virus takes place inside the nucleus of a host cell where also
progeny capsids are assembled. The genome of a host cell is packed in the nucleus
into a smaller volume as chromatin and its structure affects how the capsids move
in the nucleus. Herpes infection leads to structural changes in the host cell’s nucleus
including chromatin marginalization to nucleus’s periphery and expansion of the
nucleus and viral replication compartment. In the nucleus capsids move by
diffusion mainly in interchromatin spaces and egress by budding into the inner
nuclear membrane. In this study our goal was to examine if the changes in host cell’s
chromatin structure affects the localization of the type 1 Herpes Simplex virus
capsids in the nucleus. This was studied by condensing or decondensing the
chromatin structure of infected Vero cells. Sample cells were immunolabeled and
imaged using confocal microscopy. Image data analyses showed that the viral
capsids had better access into the chromatin in the decondensed cells than in the
condensed cells. However, no significant difference was seen in the capsid
distributions. The capsid distribution was similar over almost the entire measuring
range which differed from the expected.
|
|---|