AKR1C3-entsyymin tuotto-, puhdistus- ja kiteytysolosuhteiden optimointi
Aldo-keto-reduktaasi (AKR) kuuluu oksidoreduktaasin superperheeseen. Ihmisen (Homo sapiens) AKR1C3 (aldo-keto reduktaasi C3) säätelee elimistön hormonituotantoa osallistumalla prostaglandiini- ja steroidisynteeseihin. Häiriöt AKR1C3-geenin toiminnassa vaikuttavat ratkaisevasti erilaisten sairauksien...
| Päätekijä: | |
|---|---|
| Muut tekijät: | , , , , , |
| Aineistotyyppi: | Pro gradu |
| Kieli: | fin |
| Julkaistu: |
2018
|
| Aiheet: | |
| Linkit: | https://jyx.jyu.fi/handle/123456789/60085 |
| Yhteenveto: | Aldo-keto-reduktaasi (AKR) kuuluu oksidoreduktaasin superperheeseen. Ihmisen
(Homo sapiens) AKR1C3 (aldo-keto reduktaasi C3) säätelee elimistön
hormonituotantoa osallistumalla prostaglandiini- ja steroidisynteeseihin. Häiriöt
AKR1C3-geenin toiminnassa vaikuttavat ratkaisevasti erilaisten sairauksien, kuten
hormoniriippuvaisten syöpien syntymiseen. Tällä hetkellä kliiniseen käyttöön ei ole
hyväksytty yhtään AKR1C3-entsyymiin kohdennettua lääkeainetta. Tutkimuksen
tavoitteena oli optimoida rekombinanttisen AKR1C3-proteiinin tuotto- ja
puhdistusolosuhteet sekä tutkia tietokonemallinnuksella suunniteltujen
molekyylien sitoutumista AKR1C3-entsyymiin. Tuotto- ja puhdistusmenetelmien
optimoinnissa onnistuttiin saamaan 0.5 l tuotolla 11.9 mg 96.5 % puhdasta AKR1C3-
proteiinia. Molekyylien sitoutumista AKR1C3-entsyymiin tutkittiin
lämpötilariippuvaisella fluoresenssispektroskopialla. 64 tutkitusta molekyylistä 6
molekyyliä sitoutui AKR1C3-entsyymiin. Molekyylien sitoutumismuodon
määrittämiseksi AKR1C3-entsyymi ja ligandi kiteytettiin riippuva pisara –
menetelmän sekä liuotuskokeen avulla. Muodostuneista kompleksikiteissä
havaittiin diffraktiota röntgenkristallografialla (MASSIF-1, ESRF). Tutkimuksessa
löydettiin uusi suunta AKR1C3-kohdennetun lääkkeen kehittämiseen –
kumariinijohdannaiset ligandit.
|
|---|